慢病毒介导的PRL-3 shRNA对结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响
Tianjin Medical Journal(2018)
Abstract
目的 观察慢病毒介导的shRNA沉默肝再生磷酸酶-3(PRL-3)基因对结肠癌SW480细胞增殖、侵袭、凋亡的影响.方法 实验分组为空白对照组、阴性对照组、转染组.将携带PRL-3 shRNA的慢病毒载体转染结肠癌SW480细胞,建立稳定沉默PRL-3的细胞株,real-time PCR检测转染后PRL-3 mRNA的相对表达水平.采用MTT法、平板克隆形成实验检测转染后细胞增殖能力;采用Transwell侵袭实验、侵袭小室法检测转染后细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测转染后细胞凋亡率变化.结果 稳定沉默PRL-3的细胞株构建成功,转染组PRL-3 mRNA的相对表达水平低于空白对照组、阴性对照组(P<0.05),空白对照组、阴性对照组比较差异无统计学意义.PRL-3 shRNA转染SW480细胞72 h后,转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞增殖能力受到抑制,转染120 h时最明显(P<0.05).转染组克隆形成能力较空白对照组、阴性对照组下降(P<0.05).转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞迁移、侵袭能力下降,凋亡率增加(P<0.05).结论 结肠癌SW480细胞转染PRL-3 shRNA可减少PRL-3的表达,有效抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,PRL-3可能成为治疗结肠癌的靶基因.
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Key words
gene silencing,colonic neoplasms,cell line,tumor,cell proliferation,apoptosis,phosphatase of regenerating liver-3
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