谷氨酰胺预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其对eNOS-NO通路的影响

目的：探讨谷氨酰胺（Gln）预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤（IR）后的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）/一氧化氮（NO）信号通路的影响。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术（Sham）组、IR组、Gln组，每组10只，Gln组给予谷氨酰胺1 g/（kg·d），连续灌胃7 d。Sham组和IR组以同等剂量生理盐水灌胃7 d。Sham组仅分离肠系膜上动脉（SMA）而根部不夹闭。IR组和Gln组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部，30 min后放松血管夹形成再灌注损伤模型。各组大鼠均于制模后24 h采集腹主动脉血和回肠标本。应用HE染色法观察肠黏膜组织形态学改变，ELISA试剂盒双抗体夹心法测定D-乳酸、内毒素含量，硝酸还原酶法检测血清NO的含量，比色法检测血清eNOS、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的含量，荧光定量PCR（RT-PCR）检测大鼠肠组织eNOS、iNOS mRNA表达水平。结果再灌注后，与Sham组相比，IR组肠黏膜绒毛上皮脱落，固有层崩解，部分绒毛顶端出血，腺体明显受损；Gln组表现为肠黏膜绒毛上皮下间隙扩大，但不明显，绒毛轻度水肿，腺体大致正常，固有层轻度水肿。IR组血清D-乳酸、内毒素、iNOS水平及肠组织iNOS mRNA表达水平均高于Sham组和Gln组（P<0.05）。IR组血清NO、eNOS含量及组织中eNOS的mRNA表达量均低于Sham组和Gln组（P<0.05）。结论谷氨酰胺预处理可以减轻肠缺血再灌注后的组织形态学改变及损伤，其机制可能与抑制iNOS表达，增加eNOS表达，从而增加NO活性有关。