MicroRNA-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的：探讨小鼠肺成纤维化细胞模型中microRNA（miR）-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响。方法24只SPF级C57BL/6小鼠随机分为假手术组和肺纤维化模型组，各12只。经气管内注入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型，采用荧光定量PCR检测各组肺组织miR-21的表达。提取小鼠成纤维细胞，胰酶消化，接种于6孔板，使细胞浓度达到30%~50%。设随机对照组、空白对照组和miR-21 mimic组。各组分别在50μL Opti-MEM加入2.5μL PBS、阴性对照储存液和miR-21 mimic储存液（20μmol/L）。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性，蛋白质印迹法检测成纤维细胞含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)和转化生长因子（TGF）-β1的表达。结果与假手术组比较，肺纤维化模型组小鼠肺组织中miR-21的表达量明显上调。与随机对照组和空白对照组比较，miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达显著上调，成纤维细胞增殖率增加，ADAMTS-1蛋白表达明显下降，而TGF-β1表达显著上调；空白对照组与随机对照组ADAMTS-1及TGF-β1蛋白表达无明显差异。结论在小鼠肺成纤维化细胞模型中上调的miR-21可通过ADAMTS-1/TGF-β1信号通路促进肺纤维化。