小分子糖蛋白SRGN与TGFβ相互作用促进非小细胞肺癌的化疗耐药

目的:探讨小分子糖蛋白丝甘蛋白聚糖(SRGN)在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗耐药中的作用。方法:在非小细胞肺癌H1299细胞株中，采用shRNA技术干扰SRGN的表达并建立稳定干扰细胞株，并用Western blot技术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证敲低效率；采用MTS方法检测稳定敲低SRGN的肺癌细胞株对化疗药物顺铂和奥沙利铂的药物敏感性；采用ELISA、Western blot及qRT-PCR检测转化生长因子β(TGFβ)对SRGN表达的影响，以及SRGN介导TGFβ细胞外分泌的作用；采用Western blot检测SRGN对上皮间质转化(EMT)相关分子的影响，以及采用在线数据生物信息学分析SRGN与EMT相关分子表达的相关性；此外采用在线预后分析软件(kmplot)分析SRGN、TGFβ与肺癌患者预后的相关性。结果:与对照组比较，敲低SRGN可明显增强NSCLC细胞对化疗药物顺铂( P＝0.032 7)和奥沙利铂( P＝0.014 2)的敏感性；TGFβ可促进NSCLC细胞中SRGN的表达，并且SRGN可促进TGFβ的细胞外分泌；SRGN可通过Snail1促进NSCLC细胞的EMT改变，分析TCGA数据库，发现在NSCLC癌组织标本中SRGN表达与CDH1(编码Ecadherin蛋白)表达呈负相关( r＝－0.25)，而与SNAI1表达呈正相关( r＝0.37)；SRGN低表达的NSCLC患者相比高表达的患者总生存期明显延长( P＝0.007 7，平均中位生存时间延长15.9个月)，而同时SRGN与TGFβ1或TGFβ2低表达的患者中位生存时间分别延长73个月或42.8个月。 结论:SRGN与TGFβ1相互作用，促进肺癌细胞EMT改变，进而促进肺癌细胞的化疗耐药。SRGN与TGFβ1或TGFβ2同时低表达可显著延长非小细胞肺癌患者总生存期。