黄芪甲苷对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨黄芪甲苷(ASI)对高糖诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的保护作用及机制.方法 体外培养NRK-52E细胞,进行分组:正常对照组:低糖(葡萄糖浓度5.5mmol/L)环境下培养;高糖组:高糖(葡萄糖浓度25 mmol/L)环境下培养;ASI各组:分别在高糖培养基内加入不同浓度ASI(20、40、80、100 μg/ml),刺激细胞24h,分别以real-time PCR及Western blot检测Smad2、Smad3、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1核酸及蛋白水平的表达,流式细胞术检测细胞凋亡;此外,在高糖培养基内加入ASI 100 μg/ml,刺激细胞0、4、8、12、24、48 h,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,高糖组细胞凋亡增加(P＜0.01),浓度为40、80、100μg/ml的ASI可抑制高糖诱导的细胞凋亡(P＜0.05).ASI 100 μg/ml作用于细胞8h后,细胞凋亡显著受抑(与0h相比,P＜0.05),且随着时间的延长,有逐渐增强的趋势.高糖可诱导NRK-52E细胞上调表达α-SMA、TGF-β1、Smad2、Smad3,ASI可下调高糖诱导的上述因子表达.结论 黄芪甲苷可通过减轻高糖诱导的NRK-52E细胞凋亡,并抑制α-SMA表达及TGF-β1/Smad信号通路活性,从而延缓肾小管上皮细胞转分化,减轻肾小管间质损伤.