高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的 本实验旨在探讨高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达的影响及其在糖尿病肾病中的意义.方法 体外培养肾小管上皮细胞(NRK-52E),分成LG组(给予5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养)和HG组(给予25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养),不同时间收集细胞,采用细胞免疫化学、Rt-PCR、Western Blot检测TLR4蛋白和mRNA表达情况,同时取细胞培养上清液用Elisa法检测IL6、TNF-α水平.结果 在高糖刺激6 h TLR4 mRNA出现表达明显增高,维持较高表达至274 h,而48 h后表达有所下降(P<0.05).HG组培养24h TLR4蛋白升高,48h TLR4蛋白表达进一步升高,与LG组比较差异有统计学意义(P<0.05).HG组NRK-52E上清液IL-6、TNF-α的表达较LG组明显升高(P<0.05),并与TLR4蛋白呈正相关(r=0.799,0.820).结论 高糖可能通过上调NRK-52E的TLR4的表达,导致TNF-α、IL-6等炎性因子表达升高,TLR4参与了糖尿病肾病的进展.