人羊膜间充质细胞的分离培养及其生物学特性探讨

目的：对人羊膜间充质细胞（hAMC）的分离培养及其生物学特性进行探讨。方法：取38～40周孕妇剖腹产术后羊膜，用多种酶消化分离提纯hAMC ，观察其体外生长的特征和形态学；用免疫细胞化学方法检测hAMC的神经及肝脏发生相关蛋白的表达；同时探讨其致瘤性。结果：从羊膜中分离出高纯度hAMC ，并摸索出其最适合的培养条件；细胞成细长梭形或星形，胞质丰富，细胞核呈圆形，1～3个核仁，易贴壁，生长繁殖快，在体外可连续培养10代以上。免疫细胞化学结果显示：神经发生相关蛋白（Musashi‐1、Nestin、Vimentin）阳性以及肝脏发生相关蛋白[Flt‐1、In‐tegrinβ1、HNF（3β、4α、1α）、C／EBPα、Albumin、AAT ]等阳性；主要组织相容性复合体Ⅱ（Human M HC Class Ⅱ）阴性，主要组织相容性复合体Ⅰ（Human M HC Class Ⅰ）弱阳性；癌化实验显示hAMC无致瘤性。结论：羊膜中分离提纯的hAMC为一种具备多分化潜能的干细胞，至少可分化为神经及肝脏细胞。hAMC具有低免疫源性、无致瘤性等特点，为再生医学研究提供新的细胞来源。