人垂体瘤转化基因1抑制卵巢癌A2780细胞凋亡的分子机制研究

目的 利用小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)片段沉默卵巢癌细胞人垂体瘤转化基因1 (human pituitary tumor-transforming gene 1,hPTTG1)基因表达,探讨其抑制细胞凋亡的分子机制.方法 通过脂质体将hPTTG1 siRNA转染A2780细胞(hPTTG1 siRNA干扰组),并设立正常组和阴性对照组,转染48 h后进行检测.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染前后hPTTG1 mRNA表达水平的变化,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测survivin mRNA和蛋白表达水平,采用DNA梯带电泳法和碘化丙啶单染法分析细胞凋亡,采用比色法测定胱天蛋白酶(caspase)-3活性.结果 hPTTG1 siRNA可抑制A2780细胞内hPTTG1 mRNA表达;hPTTG1 siRNA干扰组可见典型的细胞凋亡阶梯状电泳,流式细胞仪检测该组细胞凋亡率为(17.53±2.17)％,明显高于正常组和阴性对照组[(8.97±1.56)％、(9.64±1.31)％],差异有统计学意义(P＜0.05);hPTTG1干扰后survivin mRNA和蛋白表达均下调,caspase-3活性增强.结论 hPTTG1 siRNA可下调survivin基因表达,活化caspase-3,导致A2780细胞凋亡,其可成为卵巢癌基因治疗的潜在靶点.