与ADHD相关的外周循环microRNA芯片筛选及分析

目的 采用基因芯片技术筛选注意缺陷多动障碍(attention-deficit hyperactivity disorder,ADHD)患儿外周血清中的差异非编码小RNA(microRNA,miRNA).方法 收集ADHD患儿血清样本20例,正常儿童60例,根据性别相同、年龄、身高和体重相仿的标准配对形成1:3的病例组.采用含有2549种人类miRNA探针的安捷伦公司的人miRNA芯片V21.0(agilent human miRNA microarray V21.0)获取ADHD患儿与正常儿童的miRNA谱,将检测到的miRNA信号值进行配对T检验分析,筛选出表达差异有统计学意义的miRNA,然后通过实时荧光定量PCR技术验证芯片结果.结果 芯片筛选结果显示,和正常儿童比较,ADHD患儿血清中miR-30d-5p、miR-19b-3p、miR-6085、miR-19b-3p、miR-6749-5p、miR-6826-5p、miR-3960等61个miRNA比较,差异有统计学意义(P＜0.05),其中fold change＞2倍的有miR-30d-5p(fold change=0.48,P=0.002)、miR-4655-3p (fold change =0.43,P=0.002)和miR-7641(fold change=0.47,P=0.02),这些差异表达的miRNA在20例ADHD患儿外周血清中均降低,选择改变量超过两倍的miR-30d-5p,miR-4655-3p,miR-7641进行实时荧光定量PCR验证,结果与芯片一致.结论 与正常儿童比较,ADHD患儿外周血清中,miR-30d-5p,miR-4655-3p和miR-7641表达量降低,并且可能成为诊断ADHD的潜在指标.