调控SOX2对HPV-16阳性宫颈癌细胞增殖转移的影响

目的 探讨SOX2基因对HPV-16阳性宫颈癌细胞株增殖转移的影响.方法 培养Caski-EGFP细胞后,采用空白腺病毒、SOX2基因沉默的腺病毒载体、SOX2基因过表达的腺病毒载体转染Caski-EGFP细胞并将细胞依次分为C、S、E组.Western blot法及实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测SOX2及mRNA水平,检测细胞是否构建成功;CCK-8细胞增殖实验检测各组癌细胞的光密度值,绘制细胞活力曲线,分析SOX2基因对宫颈癌细胞株增殖活力的影响;Transwell侵袭试验分析各组癌细胞侵袭抑制率的改变,探讨SOX2基因对宫颈癌细胞株侵袭转移能力的影响.结果 RT-PCR、Western blot法检测,结果显示mRNA、SOX2蛋白表达量分别为E组＞C组＞S组,差异有统计学意义(P＜0.05),提示构建的细胞构建成功可进行下一步实验.CCK-8细胞增殖实验结果显示,不同时间下,C组、S组、E组吸光度值、细胞活力均呈上升趋势,3组都在72h达到高峰,差异有统计学意义(P＜0.01);比较各时间点下3组癌细胞的吸光度值及细胞活力差异,癌细胞培养后第0、24、48及第72h,E组相较于对照组C组而言,癌细胞的吸光度值及细胞活力均显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01,Fc-E组间=3.764,Pc-E组间=0.001),S组相较于对照组C组而言,癌细胞的吸光度值及细胞活力均有所降低,差异有统计学意义(P＜0.01).E组相较于对照组S组而言,癌细胞的吸光度值及细胞活力均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01,F组间=4.286,P组间=0.000);不同时间点与分组之间存在交互作用(F交互=3.784,P交互=0.001);Transwell小室实验结果显示,以C组实验对照组的细胞侵袭能力设定为100％,则E组的相对侵袭抑制率为146％;S组细胞的相对侵袭抑制率为75％.对比可知,E组的细胞侵袭能力高于实验对照组C组,差异有统计学意义(P＜0.01);S组低于实验对照组C组,差异有统计学意义(P＜0.05);E组细胞侵袭能力明显高于S组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 本研究进一步探讨了SOX2基因对高危型HPV感染(HPV-16)的宫颈癌细胞株增殖能力及侵袭转移能力方面的促进作用,抑制SOX2的表达有望成为一种早期诊断治疗宫颈癌的新途径.