miR-370-5p对前列腺癌细胞周期及增殖的影响

目的 研究miR-370-5p导入对前列腺癌细胞株DU-145和LNCaP细胞周期和增殖的影响.方法 合成miR-370-5p(实验组)和dsControl(阴性对照组),分别转染至两个细胞株.利用Real-time PCR和Western blot法分别检测细胞转染后p21、CDK4、Cyclin D1 mRNA和蛋白的表达变化.流式细胞术分析细胞周期变化,利用MTT法和集落形成实验分析细胞活力和增殖能力.结果 Real-time PCR结果提示,转染miR-370-5p后DU-145和LNCaP细胞中p21 mRNA水平分别上调3.43倍(P＜0.01)和3.06倍(P＜0.01),CDK4 mRNA水平分别下调0.51倍(P＜0.01)和0.43倍(P＜0.01),Cyclin D1 mRNA水平分别下调0.31倍(p＜0.01)和0.35倍(P＜0.01).Western blot法检测结果符合这一趋势.流式细胞术检测结果显示,转染miR-370-5p后,位于S期和G2/M期的细胞比例下降,位于G0/G1期的细胞比例则上升,说明细胞周期被阻滞在G0/G1期.MTT分析结果显示,与dsControl组相比,转染miR-370-5p后,DU-145和LNCaP细胞活力明显降低.集落形成实验显示,miR-370-5p组的集落数数量明显较少,细胞增殖能力降低.结论 miR-370-5p能显著激活前列腺癌细胞中p21蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞周期的进展和增殖.