miR-4295靶向结合PTEN促进EMT和鼻咽癌细胞的侵袭

目的 探讨miR-4295在鼻咽癌细胞侵袭、转移过程中的作用及相关的分子机制.方法 首先通过PCR检测鼻咽癌细胞系中miR-4295的表达,通过用重组逆转录病毒介导建立稳定高表达miR-4295的鼻咽癌细胞株5-8F/miR-4295.分别应用Transwell侵袭实验、划痕损伤修复实验及三维培养实验检测过表达miR-4295后细胞株5-8F的迁移、侵袭能力;WB和QPCR方法检测E-Cadherin、Fibronectin、Vimentin在5-8F/miR-4295及5-8F/vector细胞中蛋白及miRNA的表达水平;荧光素酶活性检测miR-4295与PTEN靶向结合情况.结果 miR-4295在鼻咽癌细胞系中高表达,通过Transwell侵袭实验、划痕损伤修复实验、三维培养实验均显示过表达miR-4295后5-8F细胞的体外迁移及侵袭能力明显增强;WB及QPCR结果显示:过表达miR-4295后,5-8F细胞上皮细胞分子标志物E-Cadherin表达下调,间质细胞分子标志物Fibronectin、Vimentin表达上调;过表达miR-4295后PTEN蛋白表达抑制荧光素酶活性降低.结论 miR-4295靶向调节PTEN蛋白促进上皮细胞间质化的过程增强鼻咽癌细胞的转移及侵袭.