IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究
Journal of Modern Medicine & Health（2019）
Abstract
目的 构建异柠檬酸脱氢酶2 (IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体.方法 构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293细胞,观察感染效率.结果 PCR鉴定结果显示,2组重组质粒在1.0～2.0 kb间各出现一条明显扩增带,片段大小与IDH2目的片段大小一致(1 359 bp).对感染293T细胞观察发现,48 h后绿色荧光的强度和范围明显增加;病毒滴度为:1.0×108 TU/mL.感染HEK293细胞的效率在90％以上.结论 IDH2野生型和突变型慢病毒构建成功,能够高效地感染细胞.
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