尿蛋白电泳分析和质谱鉴定

目的：探究尿蛋白的最佳沉淀方法，且对常规损失蛋白进行鉴定分析。方法采用有机溶剂沉淀法，即用三氯乙酸/90%丙酮法、三氯乙酸/100%丙酮法和90%丙酮法分别沉淀尿液中蛋白质，对90%丙酮法所得到沉淀的可溶部分和不溶部分进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺分离和质谱鉴定。结果90%丙酮沉淀法获得的尿蛋白量相对较高。将90%丙酮法沉淀的尿蛋白不溶部分和可溶部分进行质谱鉴定，可溶部分得到53种蛋白，不溶部分得到49种蛋白，且不溶部分特有的蛋白包括免疫球蛋白κ轻链基因1～5、谷氨酰氨肽酶、突变体1、芳基硫酸酯酶A前体等14种。结论尿液沉淀的不溶部分中特有蛋白的发现有助于尿液蛋白质组的全谱研究，对临床特异蛋白的检测具有重要意义。