抗痫增智颗粒调控TLR4/HMGB1/p-IκB-α信号通路保护癫痫幼鼠海马神经元的分析

目的 观察抗痫增智颗粒对癫痫幼鼠海马神经元的保护作用,并探讨对调控Toll样受体4(TLR4)/高迁移率族蛋白1(HMGB1)/磷酸化核因子抑制蛋白α(p-IκB-α)信号通路的调控作用.方法 建立癫痫模型,阳性组予以托吡酯5.9 mg/kg溶于2 mL/100 g生理盐水中灌胃,低浓度组、中浓度组、高浓度组予以抗痫增智颗粒药液灌胃,抗痫增智颗粒质量分别是1.28 g/kg、2.56 g/kg、5.12 g/kg,模型组和正常组予以生理盐水灌胃,均每天1次,干预4周.Racine分级标准和Morris水迷宫实验评价干预前后行为学,学习/记忆能力变化;苏木素-伊红(HE)染色观察海马区病理变化;逆转录实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测海马区TLR4、HMGB1 mRNA表达,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测海马区TLR4、HMGB1、IκB-α蛋白的相对表达量及p-IκB-α.结果 干预后阳性组和3浓度组行为学Racine分级、学习/记忆能力指标均较干预前显著改善;干预后模型组海马神经元病理严重变化,阳性组和3浓度组均有所改善;阳性组和3浓度组海马区神经元损伤减轻;模型组TLR4、HMGB1 mRNA、TLR4、HMGB1蛋白的相对表达量、p-IκB-α水平均较正常组显著升高(P<0.01),阳性组和3浓度组均较模型组显著下降(P<0.01);中浓度组和阳性组上述指标差异均无统计学意义(P>0.05),且抗痫增智颗粒的作用呈浓度依赖性.结论 抗痫增智颗粒可改善癫痫幼鼠的行为学与学习/记忆能力,减轻海马神经元变性和坏死,且高浓度药物的作用优于托吡酯,推测是通过调控TLR4/HMGB1/p-IκB-α实现的.