鼠痘病毒荧光定量 Taqman-PCR检测方法的建立与应用

目的：建立鼠痘病毒的荧光定量Taqman-PCR检测方法，以期能快速、准确、灵敏、特异的检出鼠痘病毒。方法经过比对和筛选，本研究选取鼠痘病毒的ERPV＿027基因480－800位序列段，作为引物设计位点设计引物和探针，并对该引物对和探针的特异性、灵敏性、稳定性和重复性进行检测。结果本研究建立的方法，对鼠痘病毒的检测极限是68 copies／μL；该方法特异性强，只对鼠痘病毒特定片段进行特异性扩增，而对小鼠肝炎病毒、仙台病毒、沙门氏菌等其它病毒、细菌无扩增；该方法稳定性和重复性均较好。结论本研究成功建立了检测鼠痘病毒的荧光定量Taqman-PCR方法，该方法特异性强、灵敏度高，且具有较好的稳定性和重复性，具有广阔的应用价值。