去甲斑蝥素对人真皮淋巴管内皮细胞体外三维培养淋巴管生成的影响及其机制

目的 观察去甲斑蝥素(NCTD)对人真皮淋巴管内皮细胞(HDLEC)体外三维培养淋巴管生成的影响,并分析其机制.方法 构建HDLEC体外培养淋巴管生成模型,遵循随机原则分为NCTD组与空白对照组,于NCTD组加入1/3IC50NCTD40nM,持续反应24 h,对两组淋巴管生成的形态变化情况以及淋巴管生成因子蛋白、基因表达情况予以比较.结果 NCTD组呈现出明显的HDLEC细胞形态改变,仅有少部分表现为管状结构,随着时间的延长,细胞表现为浮起、变圆形态直至死亡.空白对照组淋巴管生成数量为(67.29±5.36)个,NCTD组淋巴管生成数量为(10.92±2.35)个,差异有统计学意义(t=23.552,P＜0.05);经过免疫细胞化学染色及Western blot试验,可以发现NCTD组三维培养淋巴管中的VEGF-C以及VEGF-D蛋白呈现出明显的下降趋势,分别为(2.43±0.12)％、(16.09±1.24)％,且对VEGF-C、VEGF-D以及VEGFR-3基因表达呈现出降低趋势,差异有统计学意义(t=8.493、10.275、6.432,P＜0.05).结论 去甲斑蝥素能够对淋巴管生成因子VEGF-C以及VEGF-D蛋白及基因表达进行下调,进而起到抗淋巴管生成作用.