伊班膦酸钠对骨巨细胞瘤基质细胞凋亡及成骨分化的影响研究

目的 探讨双膦酸盐(伊班膦酸钠)对骨巨细胞瘤基质细胞的诱导凋亡及成骨分化作用.方法 对我院收治的12例伊班膦酸钠治疗前后患者的肿瘤组织切片进行免疫组织化学染色(BSP、collagen I)、TUNEL 凋亡染色及图像分析.另 15例未予伊班膦酸钠治疗的患者,取术中切除的骨巨细胞瘤新鲜组织进行细胞原代培养,分别给予1μmol/L伊班膦酸钠诱导肿瘤细胞7d、14d、21d,并行Annexin-V FITC 凋亡染色及流式细胞仪定量分析;采用RT-PCR检测各组基质细胞BSP、collagen I、Osteocalcin的基因表达.结果 伊班膦酸钠治疗后的肿瘤组织切片TUNEL染色呈强阳性;基质细胞凋亡率治疗前为2.48%,治疗后31.29%(P<0.05);经伊班膦酸钠治疗后组织中BSP、collagenI蛋白的表达明显增加(P<0.05).在原代培养的骨巨细胞瘤基质细胞中予1μmol/L伊班膦酸钠作用7d、14d、21d后,细胞数量减少,Annexin-V FITC 凋亡染色及流式细胞仪定量分析结果 显示,1μmol/L伊班膦酸钠组的凋亡率显著高于对照组( P<0.05) ,且凋亡率随着作用时间的延长而增加;伊班膦酸钠组中BSP、collagen I、Osteocalcin基因的表达也均显著高于对照组,并与作用时间呈正相关(P<0.05).结论 伊班膦酸钠能够诱导骨巨细胞瘤基质细胞的凋亡,同时调节成骨相关基因的表达而促进其向成骨细胞分化,因此伊班膦酸钠可以作为骨巨细胞瘤辅助治疗的方法 之一.