抗-CD3/CD28磁珠活化T细胞的实验研究

目的 探究在不同磁珠比例条件下,抗-CD3/CD28磁珠刺激活化T淋巴细胞,对T细胞的增殖和CD8+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(Stem Central Memory T cells,TSCM)的影响,为T细胞相关奠定实验基础.方法 采集健康成年人外周血及脐带血,通过密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)和脐血单个核细胞(Umbilical Cord Blood Mononuclear Cell,UCBMC),采用不同比例(磁珠比细胞:1:2、1:1、2:1、3:1)的磁珠刺激活化PBMC及UCBMC,诱导培养7d,通过多色流式细胞术检测T细胞的增殖和CD8+细胞亚群中TSCM变化情况.结果 T淋巴细胞采用磁珠刺激活化后,实验组T细胞增殖倍数较空白对照组均明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);活化PBMC的实验中,当磁珠与细胞比例为1:2刺激活化7d后,T细胞累积增殖倍数为(9.07±0.04,n=3)均高于1:1、2:1、3:1各组,差异具有统计学意义(P＜0.05);TSCM亚群比例为(86.74％±0.79,n=3)也均高于1:1、2:1、3:1各组,差异具有统计学意义(P＜0.05).活化UCBMC的实验中,当磁珠与细胞比例为3:1刺激活化7d后,T细胞累积增殖倍数为(8.75±0.08,n=3)均高于2:1、1:1、1:2各组,差异具有统计学意义(P＜0.05);TSCM亚群比例为(95.46±0.16,n=3)亦均高于2:1、1:1、1:2各组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 在PBMC中,采用磁珠与细胞比例为1:2刺激活化时,T细胞增殖状态及细胞亚群中TSCM比例明显优于其他实验组;在UCBMC中,采用磁珠与细胞比例为3:1刺激活化时,T细胞增殖状态及细胞亚群中TSCM比例明显优于其他实验组.实验和临床研究可更根据不同的T淋巴细胞来源,选择最佳的磁珠活化比例.