PRRX1对乳腺癌多药耐药发生的影响及其机制

目的 探讨配对相关同源框1(PRRX1)对乳腺癌多药耐药(MDR)发生的影响及其机制.方法 选取乳腺癌MCF-7细胞进行培养,当细胞融合达80%后分离接种于24孔板中,细胞分为3组,未处理的MCF-7细胞为空白对照组(A组),转染空白载体的MCF-7细胞为阴性对照组(B组),转染携带PRRX1基因质粒的MCF-7细胞为实验组(C组).用倒置荧光显微镜观察各组细胞形态变化及转染情况.通过RT-qPCR和WES蛋白印迹定量分析系统分别检测各组细胞PRRX1、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)以及P-糖蛋白(P-gp)mRNA及蛋白表达水平.用CCK8试剂盒评估多西他赛和顺铂对各组细胞的半数抑制浓度(IC50).结果 B组和C组细胞均发出绿色荧光,转染效率约80%.PRRX1过表达使C组的MCF-7细胞由"铺路石"形态向"长梭形"形态转变.C组细胞的PRRX1、N-cadherin、vimentin和P-gp mRNA及蛋白表达水平与A、B组比较均明显升高(t=3.02～10.92,P＜0.05).经多西他赛和顺铂处理细胞24h后,C组两种药物的IC50值明显高于A、B组(t=4.54～5.68,P＜0.05).结论 PRRX1过表达可使乳腺癌MCF-7细胞发生MDR,其机制可能是通过诱导MCF-7细胞发生上皮间质转化而实现的.