柑橘黄化脉明病毒一步法RT-qPCR检测体系的建立及应用

柑橘黄脉病是由柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)引起的一种新发病害,对柑橘产业尤其是柠檬产业危害较重.我国于2009年首次在云南省瑞丽市发现该病,四川、重庆、江西等省市也陆续发现并呈快速传播趋势.CYVCV检测方法包括指示植物鉴定、酶联免疫吸附法、直接组织点免疫法(宾羽等,2015)、RT-PCR(陈洪明等,2015)、逆转录环介导等温核酸扩增法(刘科宏等,2015)等.指示植物鉴定耗时长且受环境条件限制;直接组织点免疫法操作简便、成本低廉,适合田间样品大规模检测,但灵敏度及准确性不足;RT-PCR特异性强、灵敏度高.为进一步提高检测灵敏度,本试验拟建立一步法实时荧光定量RT-qPCR,以期快速、灵敏、特异地检测CYVCV.