高羊茅高效组织培养再生体系的建立

植物分子育种与基因功能鉴定是建立在高效的组织培养再生体系基础上的.本研究以高羊茅(Festuca arundinacea Schreb)为材料,探讨了不同外植体状态、基本培养基类型、外源激素组合与固化剂种类与浓度对愈伤组织诱导的影响,并进行了愈伤组织分化长芽与生根研究.结果 表明:愈伤组织诱导过程中,离体成熟胚比完整种子作外植体愈伤组织出现早、质量优、诱导率高;基本培养基的选择上以N6诱导率最高,MS最低;激素组合研究中高羊茅三个品种(SAFari,FirewarⅡ,Barleduc)在无6-BA培养基中,生长激素选择上都是2,4-D优于IAA,2～2.5 mg/L 2,4-ID在三个品种中诱导率都在50％以上,而在添加0.5 mg/L 6-BA时诱导率都偏低;固化剂选择上则以Phytagel与Agarose二都最优,Phytagel固化剂最佳诱导浓度为2～4 g/L.分化长芽最佳培养基为MS+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+20 mg/L AgNO3+2％蔗糖+0.6％琼脂,生根壮苗最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+3％蔗糖+0.3％ Phytagel.本研究为高羊茅的高效转基因体系建立与CRISPR基因功能研究提供准备.