“Gros Michel”香蕉胚性细胞悬浮系及遗传转化体系的建立

本研究以“Gros Michel”香蕉未成熟雄花序为外植体,建立了其胚性细胞悬浮系及遗传转化体系.结果表明,90d后可诱导产生浅黄色松散的胚性愈伤组织,经悬浮培养120d后获得含有均质细胞团的胚性细胞悬浮系(ECS);将3个月龄的ECS置于胚诱导培养基30 d后有大量白色半透明状球形的体细胞胚发生,继代培养60 d后发育为成熟不透明的体细胞胚;将成熟的体胚在萌发培养基上培养10d后有幼芽产生,转移至生根培养基30 d后得到幼苗.同时开展了含绿色荧光蛋白(GFP)的pCAMBIA0380载体的遗传转化研究,经过3次液体培养基筛选转移至半固体筛选培养基90 d后,在胚萌发培养基和生根培养基中不再添加抗生素.经对转化植株的根尖镜检及PCR鉴定,均为阳性植株.研究结果将为进一步开展“Gros Michel”优质抗病基因功能研究提供材料和技术支撑.