五莲杨(Populus wulianensis)再生体系建立及试管苗玻璃化的防治

为开展特有树种五莲杨异地保存与离体保存、促进其保护利用,以其两年生春梢嫩芽为外植体建立组织再生体系.结果 表明,五莲杨玻璃化发生率高达65.9％,且与基础培养基的类型显著相关;采用两步正交试验L9(34)方法探索了不同生长调节因子和外源添加物对五莲杨试管苗玻璃化的影响,筛选出五莲杨初代培养基配方:1/2MS (NH4NO3)+0.05 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,试管苗不定芽玻璃化发生率降低至5％以下,平均苗高5.32 cm;将基础培养基调整为MS,微调节NAA和6-BA浓度,筛选出五莲杨增殖培养基配方:MS+0.04 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,试管苗不定芽增殖系数为15.35,平均苗高5.64 cm,无玻璃化试管苗,无菌苗茎叶粗壮且生长旺盛;调节NAA、IBA浓度及蔗糖配比,筛选出五莲杨生根培养基配方:1/2MS+0.05 mg/L NAA+15 g/L蔗糖+7.0 g/L琼脂粉,五莲杨生根率达92.0％,平均苗高为4.07 cm;幼苗经炼苗后进行移栽,成活率可达95％.本研究建立了五莲杨组织快繁体系,并通过正交实验的方法解决了试管苗玻璃化的问题,为五莲杨遗传转化及分子育种提供了理论依据.