发菜1,4-α-葡聚糖分支酶(GBE)的基因克隆及其对干旱胁迫的响应

由glgB基因编码的1,4-α-葡聚糖分支酶(GBE)是催化调控α(1-6)糖苷键分支合成的关键酶.本研究从发菜中克隆获得1,4-α-葡聚糖分支酶glgB基因全长2 292 bp (GeenBank登录号:KX679395),编码763个氨基酸.原核表达得到88.6 kD的glgB基因外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS质谱分析表明外源蛋白为GBE.发菜glgB与点形念珠藻的glgB序列相似性为94％,氨基酸序列相似性为97％;GBE在第747位的甘氨酸疏水性最强,第168位的组氨酸亲水性最强;Thr有15个磷酸化位点,Tyr有12个磷酸化位点、Ser有27个磷酸化位点;GBE二级结构及三级结构由α螺旋、β折叠、随机卷曲和β转角构成.发菜glgB在干旱胁迫下转录水平的表达量逐渐增加,GBE含量增加,糖原合成酶活性和糖原含量均先增加后降低.研究结果为认识glgB基因信息和发菜响应干旱胁迫的糖原代谢和调控机制提供了依据.