甘蓝型油菜BnGPAT9基因启动子克隆与表达载体构建

Molecular Plant Breeding(2019)

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摘要
甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)在植物三酰甘油脂(TAGs)等油脂合成中起着重要作用,而GPA T9基因是GPAT基因家族中参与油脂合成的重要基因.本研究采用电子克隆技术,以甘蓝型油菜湘油15为模板克隆了BnGPAT9基因的启动子序列pBnGPA T9,长度为900 bp.经过PlantCARE在线分析表明:该序列含有CAAT-box和TATA-box等区域特征元件,和多个参与光应答、激素诱导响应、逆境胁迫响应的元件,以及分生组织表达相关元件CAT-box与胚乳表达所需的顺式作用元件Skn-1_motif等,推测其可能在种子中表达较强烈,且在油菜生殖生长中有重要作用.通过双酶切,将pBnG-PAT9启动子序列替换pBI121植物表达载体上的CaMV35S,使该启动子与GUS基因融合,构建了pBnGPA T9:GUS植物表达载体.
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