利用CRISPR/Cas9基因编辑技术创制水稻光敏色素PHYB基因突变体
Molecular Plant Breeding（2018）
摘要
光敏色素是植物感受外界环境变化的最重要光受体之一,为研究光敏色素在水稻生长发育中的作用,本研究利用CRISPR/Cas9技术原理,设计水稻光敏色素基因PHYB的靶点,并将目的靶位点连接转化至载体pBUN411,成功构制了PHYB的CRISPR/Cas9表达载体,转化粳稻品种日本晴.由酶切及测序分析显示,转基因阳性植株中有6株靶位点序列发生改变,获得了碱基插入“A”或“T”和碱基缺失1 bp或2 bp的4种突变基因型,且在T0代就获得了纯合突变体.同时,本研究对T1代水稻phyB突变体进行红光照射处理,发现2叶1心期phyB突变体红光照射5d后,第3节间长度相对于野生型极显著增长.本研究利用CRISPR/Cas9系统成功对水稻PHYB基因进行了定点编辑,为进一步研究PHYB在水稻中的功能提供了参考依据.
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