木薯干旱胁迫响应CC类谷氧还蛋白基因的筛选与体外表达分析

CC类谷氧还蛋白(CC-type glutaredoxins)是高等植物中所特有的一类谷氧还蛋白,模式植物中的研究表明,CC类GRX可以与TGA转录因子互作,在植物器官发育及响应环境胁迫过程中起重要的调控作用.基因差异表达分析结果表明,木薯中有多个CC类GRX基因在叶片中的表达受干旱胁迫的诱导.为了进一步研究木薯中CC类GRX蛋白与TGA的互作,本研究选择了其中的MeGRX058和MeGRX785这两个基因作进一步体外蛋白表达分析.理化性质及二级结构预测分析表明MeGRX058和MeGRX785蛋白分子量均在llkD左右,具有谷氧还蛋白以及CC类谷氧还蛋白典型的结构域.通过构建酵母表达载体及植物表达载体,利用HA-Tag和GFP分别对MeGRX058和MeGRX785蛋白进行标记,在酵母和转基因木薯中进行表达,随后对融合蛋白的表达进行了Western blot检测.结果表明MeGRX058和MeGRX785成功在酵母和转基因木薯中表达,为进一步筛选它们的互作蛋白、研究其结构与功能做铺垫.