芒属植物AFLP分析体系的建立与优化
Molecular Plant Breeding（2016）
Abstract
对AFLP实验流程中的基因组提取、酶切等关键因素进行优化,建立了芒属植物的AFLP(扩增片段长度多态性)分析体系.本研究分别采用常规CTAB法和改良的CTAB法提取芒属植物基因组DNA,基因组分别用HindⅢ/Mse Ⅰ系统和Pst Ⅰ/Mse Ⅰ系统进行酶切和连接一步反应,连接产物稀释20倍后进行预扩增,预扩产物稀释20倍后进行选择性扩增.结果显示:采用改良CTAB法提取的DNA质量优于常规CTAB法;采用Pst Ⅰ/Mse Ⅰ系统酶切的DNA多态性高于HindⅢ/Mse Ⅰ系统.采用优化后的AFLP体系分析30份供试芒属植物材料,从64对引物中筛选出8对多态性较好的AFLP选择性扩增引物,多态性比率达到100％,表明优化后的AFLP体系适合于芒属植物的分子标记分析,为芒属植物种质遗传多样性的分子研究奠定了技术基础.
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