应用水稻叶片直接PCR扩增的方法

本研究以新鲜和冷冻的水稻幼苗叶片为材料,探索水稻叶片直接作为模板进行PCR扩增的方法.结果表明,与对照SDS法提取的DNA相比,应用新鲜或冷冻的1～2 mm2水稻叶片直接作为模板在缓冲液为10 mmol/L KCl,2.5 mmol/L MgCl2,25 mmol/L (NH4)2SO4,40 mmol/L Tris-HCl (pH 9.0),0.8％ PCR增强剂的反应体系中扩增,PCR扩增效果无明显差异;研究结果表明,该方法省去DNA体外提取过程,节约成本,操作简便,可以直接利用水稻叶片作为DNA模板进行PCR扩增.