浙江红山茶CcFAD2基因克隆及其在籽仁发育中的表达分析

基于浙江红山茶(Camellia chekiangoleosa Hu)转录组数据,克隆得到浙江红山茶CcFAD2基因.CcFAD2基因全长1482 bp,开放阅读框长度为1149 bp,编码383个氨基酸.CcFAD2蛋白的理论相对分子质量为44240,理论等电点为pI 8.43,具有4个跨膜结构域,无信号肽,亚细胞定位于内质网膜.CcFAD2蛋白二级结构包含44.39％的α螺旋、11.49％的延伸链、3.92％的β折叠和40.21％的无规卷曲.CcFAD2基因编码的氨基酸序列具有3个保守的组氨酸簇,分别为HECGHH、HRRHH和HVAHH.同源性比对和系统进化树分析结果显示:浙江红山茶CcFAD2蛋白与其他油料植物FAD2蛋白存在高度的保守性,浙江红山茶与油茶(Camellia oleifera Abel.)先聚为一亚组,再与油橄榄(Olea europaea Linn.)聚为一组,明显区别于草本油料植物.实时荧光定量PCR结果显示:CcFAD2基因在整个籽仁发育过程均有表达,其中7月14日(籽仁形成初期)的相对表达量显著高于其他时期.随着浙江红山茶籽仁的发育,籽仁中油酸相对含量在籽仁形成初期最低,之后维持在较高的水平;而亚油酸相对含量在籽仁形成初期最高,之后维持在较低的水平.上述研究结果显示:浙江红山茶籽仁发育过程中,CcFAD2基因相对表达量与亚油酸相对含量的变化趋势一致,推测该基因在浙江红山茶籽仁发育过程中具有调控功能.