球孢白僵菌DNA甲基转移酶基因Dim-2的克隆及其表达分析

本研究运用RACE技术，从球孢白僵菌中克隆出完整的DNA甲基转移酶基因Dim-2的编码区序列。该基因cDNA全长4021 bp，5′端非翻译区283 bp，3′端非翻译区303 bp，开放阅读框（ORF）3429 bp，编码1142个氨基酸。蛋白理论分子量为128 kD，理论等电点为6.13。结构域分析显示，该基因编码蛋白含有1个BAH结构域和合成5-甲基胞嘧啶的活性区域。Real-time PCR与HPLC检测表明，球孢白僵菌DNA甲基化程度会随着其生长发育的变化而不断改变。结果显示，球孢白僵菌Dim-2基因的转录表达量与基因组DNA的5-甲基胞嘧啶百分含量在菌体培养初始产孢阶段（即培养第7 d），均出现了1个低谷。这可能意味着球孢白僵菌Dim-2基因所引起的DNA甲基化与其生长发育之间具有内在的联系。本研究将为进一步探索DNA甲基化在虫生真菌生长发育中具体功能机制奠定基础。