马铃薯斑纹片病菌IAC-PCR检测方法

马铃薯斑纹片病菌(Candidatus Liberibacter solanacearum)是危害茄科、伞形花科植物的一种重要病原细菌,目前尚不能人工培养,PCR是常用检测方法.为了克服PCR检测中的假阴性,通过复合引物法人工构建扩增内标(internal amplification control,IAC),建立了马铃薯斑纹片病菌含扩增内标的PCR(IAC-PCR)检测体系.测试结果表明,当扩增内标添加量为3.90×10-4ng时,检测灵敏度达2.73×10-3ng,与常规PCR相比,添加扩增内标不影响检测灵敏度.60个样品的检测结果表明,IAC-PCR可克服常规PCR产生的假阴性,进一步提高检测结果的可信度和准确性.