基于TaqMan MGB探针的黑白轮枝菌检测方法
Plant Quarantine（2017）
Abstract
根据黑白轮枝菌(Verticillium albo-atrum)及其近似种β-微管蛋白基因(β-tubulin)序列差异,设计并合成1对引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了黑白轮枝菌的实时荧光PCR检测方法.对供试黑白轮枝菌及其近似种实验表明,该方法特异性强,只有黑白轮枝菌可被检出.通过对反应体系的优化,确定了最佳反应条件:引物终浓度为1.0 μmol/L,探针终浓度为0.7 μmol/L.灵敏度试验结果显示,最低检测限量为总DNA含量10 pg(20μL反应体系).此方法快速灵敏,为快速检测黑白轮枝菌提供了重要参考.
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