体外转录法制备南芥菜花叶病毒RNA标准品
Plant Quarantine（2014）
摘要
本研究根据南芥菜花叶病毒外壳蛋白基因保守序列,设计合成了l对引物,在上游引物的5 ′端引入T7启动子,采用RT-PCR方法获得了体外转录模板,并对转录产物RNA的浓度及OD值进行了测定.将制备的RNA标准品10倍梯度稀释后制作实时荧光定量RT-PCR标准曲线,并利用实时荧光定量RT-PCR对所获得的RNA标准品进行稳定性指标的检测.结果表明,该模板具有良好的线性关系,相关系数为0.9989.该模板稳定性好,-80℃保存30d后无显著变化.
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