番茄褪绿病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法
Acta Phytopathologica Sinica（2018）
摘要
根据番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)热激蛋白70(Hsp70)的基因序列,设计ToCV实时荧光定量PCR特异引物.利用重组质粒ToCV-1为标准品建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量方法.针对引物浓度、退火温度、特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行系列优化.结果表明,最适退火温度为63℃,最适引物浓度为0.3 μmol· L-1.熔解曲线为特异性单峰,表明其特异性良好.建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR较常规PCR灵敏100倍,且具有良好的重复性和稳定性.基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术建立的ToCV检测方法,速度快、特异性强、灵敏度高、重复性好,可以用于ToCV的定量检测.
更多AI 理解论文
溯源树
样例
生成溯源树，研究论文发展脉络
Chat Paper
正在生成论文摘要