芸薹根肿菌及油菜根肿病分子检测与早期诊断

近年来芸薹根肿菌引起的根肿病已成为我国油菜的主要病害,严重影响油菜及其它十字花科作物的产量及品质.为建立一套在土壤、植物组织和种子中精准检测根肿菌的高效分子方法,利用根肿菌ITS(internal tran-scribed spacer)序列,设计一对特异性引物(PbITS1),通过PCR反应优化体系进行根肿菌的分子检测及病害评估.结果表明,该引物及方法能够特异性检测根肿菌DNA,不受土传病原真菌、细菌、线虫及寄主植物内生菌的DNA干扰.灵敏性检测表明,模板DNA最低浓度达1pg·μL-1,土壤带菌量最低为1×103个孢子/g土,种子带菌量最低1×105个孢子/g种子.此外,该体系能够用于检测油菜及其它十字花科寄主植物(如组织、种子)和土壤类型.同时,可用于田间油菜不同生长阶段油菜根部及周围土壤的根肿菌检测.本研究建立的检测体系操作简便、适用范围广、灵敏度高、特异性强,可检测样品种类丰富,可为油菜及其它十字花科根肿病的早期诊断、流行监测与预警、综合防控等提供科学依据.