向日葵查尔酮合酶HaCHS基因的克隆与逆境应答

为探讨查尔酮合成酶(CHS)基因在向日葵抗逆机制中的作用,在核盘菌诱导向日葵转录组文库的基础上,从向日葵耐病品种龙食葵2号中克隆了1个CHS的cDNA序列,该基因开放阅读框为1 197bp,编码398个氨基酸残基,分子量为43.54kD,等电点为6.17,命名为HaCHS(GenBank登录号为KP921882).氨基酸序列分析显示,HaCHS具有CHS家族蛋白3个保守的功能活性位点(C167,H306和N339)和特征多肽标签序列GVLFGFGPGL.系统进化分析表明,HaCHS与菊科植物的大丽菊、紫茎泽兰和黑心菊等的CHS蛋白有很高的同源性,氨基酸序列相似性在93％～94％.实时荧光定量PCR结果表明,该基因在向日葵花中表达量最高为19.96,其次是盘、叶、茎和种,在根中的表达量最低为0.02.HaCHS基因表达受核盘菌、创伤、4℃低温和茉莉酸(JA)等因素调控,但对脱落酸(ABA)和水杨酸(SA)处理的应答差异不显著.