HPLC法测定孕穗期水稻剑叶中多种内源激素的含量

以孕穗期水稻剑叶为材料,建立了HPLC法,对水稻中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、玉米素(Z)和水杨酸(SA)等5种植物内源激素进行分离和测定.以甲醇为提取溶剂,再经SPE C18小柱过柱子除杂.HPLC分离采用C18(5μm×4.6×250 nm)反向色谱柱,最终采用PDA检测;以甲醇-水(0.5％乙酸)为流动相,流速为0.9 mL/min,进样量为20μL,在波长254 nm、272 nm和236 nm下同时检测.洗脱梯度为:0～4 min,A:20％～30％;4～10 min,A:30％～48％;10～20 min,A:48％～80％;20～30 min,A:80％;30～35 min,A:80％～20％;35～40 min,A:20％.结果表明,5种激素峰形良好、尖锐且保留时间稳定,方法的线性范围为3.125～1000 mg/kg,决定系数R2>0.9996,加标回收率达45.73％～116.70％.同时,本研究采用建立好的方法对不同胁迫处理下孕穗期水稻剑叶中内源激素含量进行了分离测定,效果良好.