朱顶红无菌苗叶片高效再生体系

以朱顶红(Hippeastrum vittatum)叶片为外植体进行离体培养,具有取材方便、试材充足、成本低等优势,但叶片诱导再生率极低,是朱顶红离体培养的一大难题.本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体,探究了不同植物生长调节剂和不同取材部位对不定芽诱导和继代增殖的影响.结果 表明:最佳外植体为MS培养基中培养10d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16h·d-1(光照强度36 μmol· m-2·s-1)下,不定芽诱导的最适培养基为MS+2 mg· L-1 6-BA+1 mg· L-1 NAA+2 mg· L-1 TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘花孔雀’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d形成不定芽,诱导率可达69.44％;‘黑天鹅’在培养45 d后形成愈伤组织,65 d形成不定芽,诱导率达到66.67％;最适体细胞胚诱导培养基为MS+2 mg· L-1 6-BA+1 mg· L-1 PIC,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的诱导率分别达到66.67％和63.89％;最佳不定芽增殖培养基为MS+2 mg·L-1 6-BA+1 mg·L-1 NAA+1mg·L-1 TDZ,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的增殖系数分别达到4.67和3.46;在不添加植物生长调节剂的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100％;将生根培养30d的小植株转移至室温条件下放置3d,摘去封口膜再驯化3d后,移栽至经高温消毒的草炭:蛭石(体积比)为1:1的基质中,成活率达到100％.