卷丹转基因体系构建及岷江百合LrCCoAOMT的导入

以卷丹(Lilium lancifolium Thunb.)无菌小鳞片为试材,通过切片处理、优化农杆菌侵染浓度与时间以及重悬液和共培养基成分,构建农杆菌介导的高效遗传转化体系.结果 表明,MS+ 1.5 mg·L-16-BA+ 0.5 mg·L-1 NAA+ 30 g·L-1蔗糖是切片芽分化的最佳培养基,添加100 mg· L-1抗坏血酸能有效抑制褐化并促进不定芽增殖.MS+2.0mg· L-1NAA+30g· L-1蔗糖是生根诱导的最佳培养基.抗生素敏感性测试发现,培养基中添加Kan 100 mg·L-1或Hyg 75 mg·L-1结合Cef400 mg·L-1适宜抗性筛选.GUS染色分析表明,以去除大量元素的改良MS+100 μmol·L-1 AS和去除大量元素的改良MS +1.0mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 NAA+100 μmol·L-1 AS为重悬液和共培养基,将切片在农杆菌菌液浓度OD600为0.4,侵染15 min,获得81.72％瞬时转化率和25.2％稳定遗传转化率.将岷江百合LrCCoAOMT转化卷丹,分子检测和GUS染色分析表明已获得转基因阳性株系.