梨糖转运相关基因PbTMT4启动子克隆及功能分析

以‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri'Dangshan Suli’)为材料,利用梨基因组数据库,通过PCR获得了糖转运相关基因PbTMT4 (Pbr032130.1) 2211 bp的CDS序列及其编码起始位点上游长度为1220 bp的启动子序列.使用农杆菌介导法将Pb TMT4导入拟南芥,与野生型对照植株相比,转基因拟南芥植株的生长速度更快,抽薹、开花时间更早,叶片糖积累量更高.生物信息学分析表明,该启动子中含有多个与逆境应答、激素信号和光信号相关的顺式作用元件.为进一步分析Pb TMT4启动子功能,构建了该启动子与GUS基因融合的植物表达载体并转化拟南芥.对T3代转基因拟南芥各组织进行GUS活性染色和半定量分析,发现GUS基因在根、茎、叶、花和果荚中均有表达,NaC1、干旱、GA3、MeJA以及光照处理均能一定程度上提高转基因拟南芥中GUS基因的转录水平.逆境处理发现,Pb TMT4转基因株系较野生型植株受到的伤害小.研究结果初步表明,PbTMT4可促进转基因拟南芥发育并提高糖积累量,可能在抗非生物胁迫中起重要的调控作用.