板栗SSR标记研究中聚丙烯酰胺凝胶银染显影体系的优化

Northern Horticulture(2019)

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Abstract
为筛选出高效、稳定的银染显影体系,以板栗叶片DNA为扩增模板,利用L16 (45)正交实验设计的方法,研究了AgNO3使用量、CH2O使用量、Na2CO3使用量及上样量4个主要因素对聚丙烯酰胺凝胶银染显影的影响,并对优化出的方法在银染效果、试剂使用和显影时耗等方面进行分析.结果 表明:在碱性条件下,0.1% AgNOs+1 mL CH2O+0.2 9 Na2CO3(500mL体系)+1.5μL上样量的银染显影效果最佳.筛选出的体系能有效克服胶图分辨率低、背景暗,读带不清晰和危险试剂消耗大的问题,为批量试验、快速读带提供了支持.
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