马蹄查耳酮合酶基因的克隆及其在鲜切马蹄中的表达分析
Northern Horticulture（2018）
摘要
以鲜切马蹄为试材,利用RT-PCR和RACE技术克隆马蹄CHS基因全长序列,并对该基因进行生物信息学分析及表达分析,以期为该基因的功能研究提供参考依据.结果表明:在马蹄中克隆到CHS全长cDNA序列,基因命名为CwCHS.CwCHS基因全长1 519 bp,编码394个氨基酸.CwCHS蛋白分子式为C1 927 H3 072 N526 O568 S21,分子量为43.37 kDa.该蛋白质包含3个保守结构域,含有5个酪蛋白激酶Ⅱ识别位点、1个蛋白激酶C识别位点、6个N-豆蔻酰化位点和1个糖基化位点,其二级结构以α-螺旋为主.多重比对结果表明,CwCHS具有高度保守的酶活性位点,并与其它植物的CHS蛋白有很高的同源性.系统进化分析表明CwCHS与菠萝CHS蛋白亲缘关系较近.荧光定量PCR分析结果表明鲜切马蹄贮藏过程中CwCHS表达量快速上升,水杨酸处理显著抑制了CwCHS的表达.试验发现,CwCHS的表达水平与鲜切马蹄黄化关系密切.
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