桑黄原生质体的制备与再生

为了优化桑黄(Phellinus igniarius)原生质体制备与再生体系,以桑黄DL101的菌丝体为材料,利用Design-Expert 8.0.6软件进行二次回归分析对参数酶解温度、酶解时间、酶的浓度等进行了系统的优化研究,此外,采用不同的再生培养基对桑黄原生质体的再生进行了研究.获得了制备桑黄原生质体的最佳酶系统、酶解时间以及酶解温度,分别为0.5％崩溃酶+2.0％溶壁酶、酶解3.0 h、酶解温度30℃,此时,原生质体得率最高,为1.49×107个/mL;此外,0.6 mol·L-1硫酸镁作为再生渗透压稳定剂时桑黄原生质体的再生率最高,可达到0.67％.桑黄DL101原生质体制备与再生体系的建立,为提高桑黄在后续分子遗传转化、菌种改良、基因编辑等奠定了良好的基础.