毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制剂基因PtrSPI的克隆及真核表达
Journal of Northeast Forestry University（2020）
摘要
利用PCR技术从毛果杨(Populus trichocarpa)中分离得到1条丝氨酸蛋白酶抑制剂基因PtrSPI,该基因cDNA编码区全长为1176 bp,可编码391个氨基酸.BlastP预测结果显示,该丝氨酸蛋白酶抑制剂属于SERPIN超家族.多序列比对结果表明,毛果杨PtrSPI基因的氨基酸序列与已报道的胡杨(P.euphratica)丝氨酸蛋白酶抑制剂氨基酸序列XP 011030699同源性最高,相似性为92％,且蛋白的C端氨基酸序列都含有高度保守的反应中心环(RCL).在此基础上,成功构建了PtrSPI基因的重组真核表达载体pPICK-PtrSPI并获得了重组毕赤酵母菌株GS115-PtrSPI.利用终质量分数为0.5％甲醇诱导重组真核蛋白表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在42648.45处出现了重组蛋白,与预期值一致.
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