细叶百合LpAGD14基因的克隆与表达分析
Acta Prataculturae Sinica(2018)
Abstract
从细叶百合cDNA文库中克隆得到ArfGAP基因,该基因ORF序列编码640个氨基酸,具有一个典型的C4型ArfGAP保守结构域.蛋白相对分子量约为69.43 kDa,理论等电点为8.95,为亲水性蛋白,没有跨膜结构.氨基酸序列与油棕的GTPase同源性达到59%,与芭蕉、海枣、石刁柏、凤梨的同源性都在50%以上,命名为LpAGD14.qRT-PCR分析LpAGD14表达量呈不断升高的趋势,其中休眠完全解除时基因表达量显著高于其他时期.亚细胞定位显示该基因定位在细胞膜上.超微结构观察发现随低温贮藏时间的延长高尔基体囊泡层数逐渐增多.这些结果表明LpAGD14可能通过影响囊泡运输参与细叶百合鳞茎休眠解除进程.该研究为深入了解该基因功能奠定了基础.
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Key words
ArfGAP,cloning,expression,Lilium pumilum
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