4种有机溶剂对Vero细胞活力和弓形虫增殖的影响

本研究旨在筛选低细胞毒性和低弓形虫毒性的有机溶剂.Vero细胞在96孔板培养12 h后,将培养基更换为200μL分别含0、0.1％ 、0.3％ 、0.5％ 、1％ 、3％ 、5％ 、10％(V/V)的二甲基亚砜(DM SO)、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基,同时设立空白对照孔,继续培养12和24 h后,采用噻唑蓝(M T T)法评价4种有机溶剂对Vero细胞增殖活力的影响,筛选出对宿主细胞毒性最小的有机溶剂并确定其安全浓度;弓形虫接种Vero细胞12 h后,弃上清后分别加入含有0、0.1％ 、0.3％ 、0.5％ 、1％ 、3％(V/V)的DM SO、二甲基甲酰胺、乙醇和甲醇的完全培养基120μL,接种36 h后判定各组溶剂对弓形虫增殖的影响,计数感染细胞数并计算相对感染率,筛选出对弓形虫增殖影响最小的有机溶剂及其安全浓度.结果显示,对于Vero细胞,DMSO、二甲基甲酰胺、甲醇和乙醇分别在其体积分数低于1％ 、0.1％ 、3％ 和1％ 时无明显毒性;对于弓形虫,DM SO、二甲基甲酰胺、甲醇和乙醇对弓形虫增殖的安全添加浓度分别为1％ 、0.1％ 、1％ 和0.1％.本研究表明,DMSO、甲醇对Vero细胞、弓形虫的毒性较小,可作为水溶性较差药物进行抗弓形虫筛选时优先选择的有机溶剂.