糖基化位点突变对猪圆环病毒2型增殖的影响
Chinese Journal of Veterinary Science（2018）
Abstract
为提高猪圆环病毒(PCV)的滴度,以本实验室已成功分离的1株PCV2d流行毒株PCV2 RC160307为模板,通过融合PCR突变其Rep蛋白上的1个N-糖基化位点,并成功构建自身环化感染性克隆HT-PCV2,转染ST细胞,盲传至F8代后,通过PCR、间接免疫荧光(IFA)及过氧化物酶单层试验(IMPA)进行验证,并通过IMPA测定TCID50发现,拯救成功的HT-PCV2病毒滴度为105 2×TCID50/0.1 mL,较分离的流行毒株RC160307及未糖基化位点突变的感染性克隆H PCV2的病毒滴度有所提高.此种方法为PCV2复制机制的进一步研究疫苗的研制及其疾病的预防奠定基础.
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