施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank公布的施马伦贝格病毒S基因序列,设计特异性引物,构建施马伦贝格病毒S基因重组克隆质粒作为阳性对照,经各反应条件的优化以及特异性、敏感性和重复性试验,建立了施马伦贝格病毒套式RT-PCR检测方法.结果表明,本研究建立的套式RT PCR方法可特异性的检测施马伦贝格病毒,且与BTV、EHDV、AKV、BVDV、IBRV等其他病毒的核酸不发生交叉反应.每个反应可检测到相当于6.65×102 copies/μL施马伦贝格病毒重组克隆质粒.与传统的病毒分离及血清学方法相比较,不但耗时短(仅需5h),而且费用低廉.本研究建立的套式RT-PCR方法具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,是施马伦贝格病毒快速初筛的良好方法.